Regulation of liver fatty acid binding protein expression by clofibrate in hepatoma cells

Les agonistes de PPAR (peroxysome proliferator activated receptor) comme le clofibrate affectent les niveaux de la proteine hepatique liant les acides gras L-FABP, ce qui, en retour, influence le statut oxydant hepatocellulaire. Les mecanismes d'action du clofibrate sur la modulation des niveaux de L-FABP sont mal connus. Dans cette etude, nous avons utilise le clofibrate (agoniste du PPAR-alpha), le MK886 (antagoniste du PPAR-alpha) et le GW9662 (agoniste du PPAR-gamma) afin d'identifier les mecanismes de regulation de l'expression de L-FABP et de son activite anti-oxydante chez les cellules d'hepatome CRL-1548. L'activite anti-oxydante a ete evaluee en quantifiant les especes reactives d'oxygene (ERO) intracellulaires par la fluorescence de la dichlorofluoresceine (DCF). L'effet du clofibrate sur l'activite cytosolique des enzymes antioxydantes intracellulaires a aussi ete mesure. La RT-PCR et la mesure de la stabilite de l'ARNm ont montre que le traitement au clofibrate augmentait la stabilite de l'ARNm de la L-FABP, ce qui resultait en une augmentation des niveaux de L-FABP. Des mesures de transcription nucleaire et par RT-PCR de l'ARNm de la L-FABP ont revele que le clofibrate augmentait le taux de transcription de la L-FABP. L'augmentation des niveaux de L-FABP etait associee a une reduction des ERO cytosoliques. Les niveaux de superoxyde dismutase, de glutathion peroxydase et de catalase n'etaient pas affectes par le traitement au clofibrate. Des etudes d'interference avec un ARNsi specifique a L-FABP ont montre que la reduction de l'expression de L-FABP etait associee a une augmentation de la fluorescence du DCF. Nous pouvons conclure que le clofibrate a augmente la transcription de la L-FABP et la stabilite de son ARNm, affectant ainsi son expression et ultimement l'activite antioxydante cellulaire.